免疫胶体金技术的基本原理是什么?免疫胶体金制备方法是什么?

来源:今日热点 | 2023-04-21 16:37:21 |

胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠(柠檬酸钠)、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金也是免疫电镜技术中较为理想的免疫标记物。

免疫胶体金技术的基本原理是什么?

胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特。 胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。 免疫金标记技术主要利用了金颗粒具有高电子密度的特,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。

免疫胶体金制备方法是什么?

用容量瓶量取200ml超纯水加入到500ml锥形瓶中,将锥形瓶置于磁力加热搅拌器加热板上,放入磁力搅拌子,打开搅拌旋钮至适当速度。用移液器吸取2ml 1%氯金酸溶液于上述200ml超纯水中,搅拌1min,关闭搅拌旋钮,打开加热旋钮,加热至沸腾。打开搅拌旋钮至适当速度,快速加入经微孔滤膜过滤。1%柠檬酸三钠溶液0.8ml,溶液在2分钟内由灰色变黑色最后变为红色,再继续加热搅拌10分钟。关掉加热旋钮,适当速度搅拌至室温,定容至200ml,4℃保存。


备案号:粤ICP备18023326号-41 联系网站:85 572 98@qq.com